幻灯二

长枝木霉SHMCCD63422-Recombinant Cynomolgus Fc gamma RIIA-扩散炭层菌

6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 是核酸电泳实验中的重要工具,其高效、稳定且操作简便的特性。

T4 UvsX重组酶是一种来源于T4噬菌体的重组酶,属于RecA/Rad51家族的同源体。它在双链DNA断裂的修复和复制叉重新启动的过程中起重要作用。T4 UvsX重组酶能够与单链DNA结合并形成核酸蛋白复合物,该复合物通过寻找与双链DNA的互补区域进行杂交,从而完成链置换反应。功能与特性链置换能力:T4 UvsX重组酶能够与单链DNA结合,形成稳定的核酸蛋白复合物,并在双链DNA中寻找同源序列,完成链置换反应。无核酸酶活性:该酶本身不具有核酸酶活性,不会降解DNA。等温扩增:T4 UvsX重组酶是重组酶聚合酶扩增(RPA)技术的核心酶,能够在37-42℃的等温条件下高效扩增DNA。应用场景等温扩增(RPA):T4 UvsX重组酶是RPA技术的关键组分,能够在等温条件下快速、灵敏地扩增DNA。病原体检测:RPA技术可用于检测多种DNA和RNA病原体,如MERS、HIV-1、埃博拉病毒和COVID-19,检测下限通常低于100个拷贝。即时诊断(POCT):RPA技术因其快速、简便的特点,非常适合现场快速诊断试剂的开发。

其中,2500 bp条带的浓度较高(约100 ng/5 µL),显示为加亮带,便于在电泳后快速定位。

phi29 DNA Polymerase 是一种来源于 Bacillus subtilis 噬菌体 phi29 的重组酶,经过基因工程改造后,具有卓越的链置换和持续合成能力。它能够在等温条件下高效扩增DNA,生成长达70 kb的DNA片段。 特性与优势 高持续合成能力:phi29 DNA Polymerase 可以连续合成超过70 kb的DNA片段,无需从模板上解离。 高保真性:具有3′→5′外切酶校正活性,保真性比Taq DNA Polymerase高100倍。 链置换活性:能够高效置换DNA链,适合滚环扩增(RCA)和多重置换扩增(MDA)。 温和反应条件:反应温度通常为37-42℃,适合等温扩增。 应用场景 全基因组扩增(WGA):用于单细胞测序、病原微生物检测和宏基因组研究。 滚环扩增(RCA):生成周期性DNA纳米模板,适用于测序模板制备。 多重置换扩增(MDA):用于无偏扩增全基因组。 高GC含量模板扩增:在NGS测序中,能够提升高GC含量和复杂模板的扩增效率。 使用方法 储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。 反应条件:37-42℃孵育1-3小时,65℃加热10分钟失活。

它能够确保miRNA在电泳过程中保持单链状态,从而获得清晰的电泳条带,便于后续分析。

GoldenView 吖啶橙核酸染料是一种新型的核酸染料,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于检测DNA和RNA。它是一种安全、高效的替代品,可替代传统的溴化乙锭(EB)染料。 产品特性 GoldenView 吖啶橙核酸染料与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度与EB相当。在紫外透射光下,双链DNA(dsDNA)呈现绿色荧光,而单链DNA(ssDNA)或RNA则呈现红色荧光。这种特性使其能够清晰地区分DNA和RNA,适用于多种核酸分析实验。 使用方法 使用GoldenView进行琼脂糖凝胶电泳时,操作方法与EB完全相同。通常在100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µl的GoldenView,轻轻摇匀后倒胶,待凝胶完全凝固后进行电泳。电泳完成后,可在紫外灯下直接观察核酸条带。 安全性 GoldenView的主要成分是吖啶橙,虽然具有细胞渗透性,但通过多项致突变性试验验证,结果均为阴性。然而,为确保安全,建议操作时佩戴手套和口罩,避免接触皮肤。

将 4S Green 10000× 储液稀释至 3× 染色液,将凝胶浸泡其中,室温振荡染色 30 分

T5核酸外切酶(T5 Exonuclease)是一种沿5'→3'方向降解DNA的核酸外切酶,能够从DNA的5'末端或线性/环状双链DNA的缺口(gap)或切刻(nick)处起始消化。它对超螺旋双链DNA无作用,并且具有单链DNA核酸内切酶活性。 特性与应用 高效降解:T5核酸外切酶能够高效降解线性单链和双链DNA,以及切刻的质粒DNA。 无缝克隆:在无缝克隆技术中,T5核酸外切酶用于从DNA片段的5'端切割一条链,产生3'突出末端,促进互补片段的退火配对,进而通过DNA聚合酶填补缺口,最后由DNA连接酶修复缺刻,形成完整的环状质粒。 Gibson组装:T5核酸外切酶在Gibson组装中发挥关键作用,通过从DNA片段的5'末端开始消化,产生互补的单链3'末端,促进片段退火和连接。 去除污染:该酶可用于去除碱裂解质粒提取过程中产生的变性DNA,提高DNA克隆效率。 使用方法 储存条件:T5核酸外切酶通常保存于-20℃,有效期可达3年。 反应条件:在37℃下反应30分钟,加入至少11 mM EDTA或含有SDS的DNA Loading Buffer终止反应。

虽然 4S GelRed 无毒,但对皮肤和眼睛仍有轻微刺激性,实验时建议佩戴手套和口罩。

Bsu DNA Polymerase (Large Fragment) 是一种经过基因工程改造的酶,来源于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的DNA聚合酶I。通过删除其5′→3′核酸外切酶结构域,保留了5′→3′聚合酶活性,同时去除了3′→5′和5′→3′核酸外切酶活性。特性与优势 链置换活性:该酶具有强大的链置换能力,能够在等温条件下高效扩增DNA。 高活性:在25℃时仍保留50%的DNA聚合酶活性,是相同温度下Klenow片段(3′→5′ exo-)活力的两倍。温和反应条件:最佳反应温度为37℃,适合在较低温度下进行等温扩增。高纯度:不含DNA内切酶、外切酶和核糖核酸酶,确保反应的特异性和可靠性。应用场景Bsu DNA Polymerase (Large Fragment) 广泛应用于以下领域:重组酶聚合酶扩增(RPA):常用于等温扩增,适合快速、灵敏的病原体检测。DNA合成:可用于cDNA第二条链的合成、随机引物法标记以及单个dA的加尾。链置换反应:在需要置换DNA链的实验中表现出色。

聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,确保样品能够沉入凝胶加样孔。

甲酰胺加样缓冲液(10×)是一种10倍浓缩的RNA上样缓冲液,广泛应用于RNA电泳实验中。它以溴酚蓝为指示剂,稀释至1×后比重仍然较大,加样后易下沉,且颜色清晰可见,起到电泳指示的作用。产品特性主要成分:去离子甲酰胺、溴酚蓝、EDTA等。保存条件:2-8℃避光保存,有效期为12个月。用途:专用于RNA电泳,能够提供清晰的指示,便于观察RNA条带。使用方法稀释:将10×甲酰胺加样缓冲液与RNA样品按1:9的比例混合,稀释至1×使用。电泳操作:将混合后的样品直接加入RNA胶内进行电泳。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。避免RNase污染:操作过程中需佩戴无RNase手套,避免使用可能含有RNase的耗材。个人防护:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。开封后尽快使用:试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。

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