幻灯二

淡紫色拟青霉MCWA18-大肠埃希氏菌SHMCCD52363-白浅灰链霉菌SHMCCD59094

dNTP Mix是一种由 dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP 组成的等摩尔混合溶液

在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是基因表达分析和病原体检测的核心技术之一。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技术,为研究人员提供了一个高效、防污染且便捷的一步法qPCR解决方案,特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应,将RNA转录为cDNA,然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果,但操作步骤繁琐,容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)采用了一步法设计,将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中,大大简化了操作流程,减少了人为误差,提高了实验的重复性和可靠性。 UDG技术的防污染机制 UDG技术是该试剂盒的核心亮点之一。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶(U)的DNA,从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前,UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。

它能够在高盐环境下保持高效活性,尤其在500 mM NaCl条件下表现出最佳活性。

Taq DNA连接酶是一种来源于嗜热菌(Thermus aquaticus)的耐高温DNA连接酶,能够催化与同一互补靶DNA链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5'-磷酸和3'-羟基之间形成磷酸二酯键。这种连接反应仅在两条寡核苷酸链与互补靶DNA完全配对且无间隙的条件下才会发生。 工作原理 Taq DNA连接酶以NAD⁺作为辅因子,在37℃至75℃的高温条件下表现出高效的连接活性。它特别适合用于连接具有较长黏性末端的DNA片段,例如12碱基对的突出末端,但对4碱基末端的连接效率较低。 特点 耐高温:在高温(37℃至75℃)条件下具有高活性,适合高温反应。 高特异性:连接反应仅在寡核苷酸链与靶DNA完全配对时发生,可用于检测单碱基替换。 高保真性:经过改造的高保真Taq DNA连接酶(HiFi Taq DNA Ligase)进一步降低了错配连接率,提高了诊断的准确性。 应用 Taq DNA连接酶广泛应用于以下领域: 分子诊断:用于连接酶检测反应(LDR)和多重连接依赖式探针扩增(MLPA),检测基因组中的单核苷酸多态性(SNP)和拷贝数变异(CNV)。

10 mg/ml EB溶液凭借其高灵敏度和操作简便性,成为核酸电泳实验中的重要工具。

DNA尿素加样缓冲液(2×)是一种专为变性核酸电泳设计的2倍浓缩上样缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由Tris、EDTA、甘油、尿素等组成,能够有效解除DNA的二级结构,保持DNA的单链构型。产品特性成分:主要由Tris、EDTA、甘油、尿素等组成,不含溴酚蓝。使用特点:加样后易下沉,便于电泳操作。保存条件:-20℃避光保存,有效期为12个月。用途:仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他非科研用途。使用方法稀释:将2×DNA尿素加样缓冲液与待测核酸样品液按照1:1比例稀释。变性处理:将混合后的样品在95°C水浴中处理5分钟,然后在冰上冷却。电泳操作:将处理后的样品直接加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。安全操作:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。用途限制:本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。DNA尿素加样缓冲液(2×)凭借其高效、稳定和清晰的指示特性,成为变性核酸电泳实验中的理想选择。

Probe qPCR Mix (2×) 可用于定量分析基因表达水平的变化帮助研究人员深入理解基因调控

溴酚蓝蔗糖溶液(0.25%)是一种专为核酸电泳设计的上样缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由溴酚蓝、二甲苯青FF和蔗糖组成,能够为核酸电泳提供清晰的指示和稳定的环境。产品特性成分:主要由0.25%溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF和15%蔗糖组成。指示剂:溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂,稀释后比重较大,加样后易下沉,颜色清晰可见,便于观察电泳进程。保存条件:室温避光保存,有效期为3个月。 使用方法稀释:通常按1:5的比例将2×溴酚蓝蔗糖溶液稀释至1×使用。电泳操作:将稀释后的缓冲液与核酸样品混合后直接加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。安全操作:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。用途限制:本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。溴酚蓝蔗糖溶液(0.25%)凭借其高效、稳定和清晰的指示特性,成为核酸电泳实验中的理想选择。

电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,然后在紫外灯下观察电泳条带。

T4 RNA连接酶2截短型(突变型)是一种经过基因工程改造的酶,通过引入特定的氨基酸突变(如R55K和K227Q),在保持高效连接活性的同时,显著降低了RNA的非特异性连接问题。这种酶能够特异性地将5'端预腺苷化的DNA或RNA连接到RNA的3'羟基末端,无需ATP参与反应。 特点 高效连接活性:能够高效连接预腺苷化的单链DNA或RNA。 低背景连接:突变型酶减少了RNA串联或自连成环等非特异性连接问题。 无核酸酶污染:经过严格测试,确保无核酸外切酶、切口酶或RNase残留。 热稳定性高:某些突变体在较高温度(如45℃和50℃)下仍保持较高的连接活性。 应用 T4 RNA连接酶2截短型(突变型)广泛应用于以下领域: 小RNA文库构建:用于二代测序(NGS)中的miRNA文库构建。 cDNA文库构建:将单链腺苷化引物连接至小RNA上。 链特异性cDNA文库构建:用于合成链特异性的cDNA文库。 使用方法 反应条件:在1×反应缓冲液中,25℃温育。 灭活条件:65℃加热20分钟。

在分子生物学实验中,6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 是一种常用的试剂。

牛痘DNA拓扑异构酶I(Vaccinia DNA Topoisomerase I)是一种来源于牛痘病毒的I型拓扑异构酶,通过基因重组技术制备和纯化。它能够特异性识别双链DNA中的5'-(C/T)CCTT-3'序列,并在该序列的最后一个T和其之后的磷酸二酯键处切割DNA。切割后,酶与DNA的3'末端形成共价复合物,随后可利用DNA的5'羟基重新连接,释放酶并完成修复。 功能与应用 牛痘DNA拓扑异构酶I具有解旋超螺旋DNA的能力,可将超螺旋DNA转化为松弛的双链环状DNA,便于后续的酶切等操作。此外,它还可用于DNA连接,无需ATP或DNA连接酶即可完成。这使得它在TOPO克隆中表现出色,能够在5分钟内高效连接DNA片段,无需传统连接酶。它还被广泛应用于NGS建库中的接头连接。 实验操作 在实验中,牛痘DNA拓扑异构酶I通常在37℃下孵育,反应体系中需包含特定的反应缓冲液。该酶的最佳反应温度为37℃,且可通过80℃加热20分钟使其失活。由于其高效性和特异性,它已成为分子生物学实验中不可或缺的工具酶。

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