幻灯二

间型荚胞腔菌-军威镇梅奇酵母SHMCCD56503-大肠埃希氏菌(大肠杆菌)M-2

酶-AMP复合物识别DNA末端的5'-磷酸和3'-羟基,将AMP转移到DNA的5'-磷酸末端。

全能核酸酶(Benzonase Nuclease)是一种源自粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的重组核酸内切酶,经过基因工程改造,能够高效降解所有形式的DNA和RNA,包括单链、双链、线状、环状和超螺旋结构。这种酶因其广泛的核酸降解能力和高效性,被广泛应用于生物制药和基础科研领域。 特性与优势 广谱降解能力:无差别切割所有形式的DNA和RNA,将其降解为2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸。 高活性与稳定性:在多种条件下(如高盐、高尿素、SDS等)仍保持高效活性。 无蛋白酶活性:不具有蛋白水解活性,不会对蛋白质样品造成损伤。 高纯度:通过基因工程在大肠杆菌中表达纯化,纯度超过99%,无内毒素污染。 应用场景 去除核酸污染:在蛋白纯化过程中,全能核酸酶可有效去除核酸污染,降低溶液粘度,提高蛋白提取效率。 细胞裂解液处理:在细胞裂解后,全能核酸酶能够降解释放的核酸,减少溶液粘度,便于后续操作。 疫苗和病毒样品制备:用于去除疫苗和病毒样品中的DNA污染,确保生物制品的安全性和功效。

通过优化的缓冲体系和酶组合,试剂盒在非特异性扩增体系中仍能保持单峰的熔解曲线,确保了结果的高特异性

10× DNA/RNA非变性上样缓冲液是一种用于核酸电泳的浓缩缓冲液,广泛应用于DNA和RNA的非变性凝胶电泳。它主要由甘油、溴酚蓝、二甲苯青等成分组成。这种缓冲液在稀释至1×后,比重较大,能使核酸样品在加样后迅速沉入凝胶孔中,同时其中的染料可以作为电泳指示剂。 优势 适用范围广:适用于双链DNA、单链DNA、RNA引物、小RNA及特定RNA的电泳。 操作简便:使用时只需将核酸样品与缓冲液按9:1的比例混合即可。 安全无污染:无RNase杂质污染,确保RNA样品的完整性。 使用方法 混合样品:将DNA或RNA样品与10×非变性上样缓冲液按9:1的比例混合均匀。 上样:将混合后的样品加入凝胶加样孔中。 电泳:根据实验需求进行电泳,观察染料迁移情况以判断电泳进程。 注意事项 防止核酸降解:操作过程中需使用无RNase的耗材,避免RNA降解。 避免反复冻融:建议分装保存,避免反复冻融影响缓冲液性能。 染色:可在样品或凝胶中预先加入核酸染料,或在电泳结束后对凝胶染色。 10× DNA/RNA非变性上样缓冲液凭借其高效、安全和操作简便的特点,已成为分子生物学实验中核酸电泳的常用工具。

建议使用2.0%-2.5%的琼脂糖凝胶,电泳电压4-10 V/cm,电泳时间20-25分钟。

两步法sgRNA合成试剂盒是一种基于PCR扩增和T7 RNA聚合酶体外转录的工具,专门用于CRISPR/Cas9基因编辑中sgRNA(单导向RNA)的合成。这种试剂盒通过两步反应实现sgRNA的高效合成,具有高产量、高纯度和高活性的特点。 工作原理 两步法sgRNA合成试剂盒的工作原理分为两个主要步骤: 模板制备:通过PCR扩增生成包含T7启动子序列和目标sgRNA序列的双链DNA模板。试剂盒提供预混的模板混合物(Template Mix),用户只需设计并合成目标特异性DNA寡核苷酸(oligo)作为上游引物。 体外转录:利用T7 RNA聚合酶在体外转录生成sgRNA。转录完成后,通过DNase I消化去除DNA模板,纯化后的sgRNA可用于后续的基因编辑实验。 优势 高产量:单次反应可在0.5-4小时内获得10-40μg的sgRNA,满足大多数基因编辑实验的需求。 高纯度:合成的sgRNA经过纯化,纯度高,条带单一,可有效减少脱靶效应。 操作简便:试剂盒提供所有必要的试剂和详细的说明书,用户只需按照步骤操作即可完成sgRNA的合成。

它能够在高盐环境下保持高效活性,尤其在500 mM NaCl条件下表现出最佳活性。

在细胞内复杂的蛋白质调控网络中,泛素化是一种关键的蛋白质修饰过程,它在蛋白质降解、细胞周期调控、信号转导等生物学过程中发挥着重要作用。泛素结合酶E2L3(Ubiquitin Conjugating Enzyme E2L3,UBE2L3)作为泛素化途径中的核心成员之一,承担着将泛素从激活酶E1传递到泛素连接酶E3的重要任务,是泛素化反应的“精准调控者”。 泛素结合酶E2L3的特性 泛素结合酶E2L3(UBE2L3)是一种高度特异性的酶,能够特异性地识别并结合由E1激活的泛素。在泛素化反应的第二步中,UBE2L3通过其活性位点的半胱氨酸残基与泛素形成共价键,从而将泛素从E1转移到自身。这一过程为后续的泛素连接酶E3介导的泛素转移提供了必要的中间体。UBE2L3在多种细胞类型中广泛表达,并在多种生物学过程中发挥重要作用,特别是在免疫应答和细胞周期调控中。 广泛的应用 UBE2L3在分子生物学研究中具有广泛的应用。例如,在体外泛素化实验中,UBE2L3被用于研究泛素化过程中的关键步骤,帮助科学家们理解泛素从E1到E3的传递机制。

这种酶能够催化合成多聚尿苷酸(Poly(U))序列,为生命科学的研究提供了重要的工具和模型。

在分子生物学和生物化学研究中,磷酸酶是一类重要的酶,用于去除核酸和蛋白质末端的磷酸基团。热敏磷酸酶(Thermolabile Phosphatase)作为一种特殊的磷酸酶,因其独特的热敏感性而备受关注。它在实验中提供了精准的去磷酸化控制,成为实验室中不可或缺的工具。 热敏磷酸酶的特性 热敏磷酸酶的主要特点是其在高温下迅速失活。这种特性使得它在实验中可以被精确地控制,避免了过度去磷酸化的问题。在反应过程中,热敏磷酸酶能够在适中的温度下高效地去除磷酸基团,而在需要终止反应时,通过简单的加热步骤即可使其失活。这种精准的调控能力使其在多种实验中表现出色。 广泛的应用 热敏磷酸酶在分子生物学研究中具有广泛的应用。例如,在DNA克隆实验中,它被用于去除DNA片段的5'磷酸基团,防止片段的自身环化,从而提高克隆效率。在RNA研究中,热敏磷酸酶可以用于去除RNA末端的磷酸基团,帮助研究RNA的加工和修饰过程。此外,它还被用于蛋白质的去磷酸化研究,帮助科学家了解蛋白质的修饰状态和功能调控。

在分子生物学研究中,Poly(U)聚合酶被广泛应用于多种实验。

成纤维细胞生长因子19(FGF-19)是成纤维细胞生长因子(FGF)家族的重要成员,主要在人体的回肠和胆囊上皮细胞中表达。FGF-19作为一种内分泌激素,参与调节胆汁酸、葡萄糖和脂质代谢,维持全身代谢稳态。 胆汁酸代谢的关键调节者 FGF-19在胆汁酸代谢中发挥着重要作用。餐后,胆汁酸从胆囊释放到肠道,协助脂质和脂溶性维生素的吸收。胆汁酸通过激活法尼醇X受体(FXR),诱导FGF-19在回肠上皮细胞中的表达。随后,FGF-19进入血液循环,与肝脏中的成纤维细胞生长因子受体4(FGFR4)和β-klotho结合,抑制胆汁酸合成的限速酶CYP7A1的活性,从而调节胆汁酸的合成。 葡萄糖代谢的调节作用 FGF-19还参与调节葡萄糖代谢。研究表明,代谢综合征或二型糖尿病患者的循环FGF-19水平低于健康对照组。FGF-19通过抑制CREB-PGC-1α信号传导,减少葡萄糖的肝脏代谢,改善胰岛素抵抗。在小鼠模型中,外源性给予FGF-19能够改善血糖状态和外周胰岛素信号传导。 与癌症的关系 FGF-19的异常表达与多种癌症的发生和发展密切相关。

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