疣梗青霉PenicilliumverrucosumAS3.2794-罕见沃特斯氏菌SHMCCD50078-酿酒酵母SHMCCD55494
它还常用于实时定量PCR(qPCR)中,通过检测荧光强度的变化来定量分析DNA或cDNA的扩增。
λ核酸外切酶(Lambda Exonuclease)是一种来源于λ噬菌体的核酸外切酶,能够特异性地作用于双链DNA,沿5′→3′方向逐步去除5′端的单核苷酸。这种酶在分子生物学实验中具有广泛的应用。 工作原理 λ核酸外切酶的最适底物是5′端磷酸化的双链DNA。它能够高效地从5′端逐步降解双链DNA,生成单链DNA或单核苷酸。该酶对单链DNA和非磷酸化的双链DNA底物的降解效率较低,分别只有磷酸化双链DNA的1%和5%。此外,λ核酸外切酶不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。 应用场景 单链DNA制备:通过降解双链DNA的一条链,λ核酸外切酶可用于制备单链DNA。例如,在PCR产物中,使用5′端磷酸化的引物,可以通过λ核酸外切酶特异性降解其中一条链,从而获得单链DNA。 DNA末端修饰:在某些克隆实验中,λ核酸外切酶可用于去除DNA片段的5′端核苷酸,以实现特定的末端修饰。 基因编辑:在基因编辑技术中,λ核酸外切酶可用于处理线性化质粒,以提高同源重组的效率。 DNA损伤研究:λ核酸外切酶可用于研究DNA损伤和修复机制,通过降解损伤的DNA片段来模拟细胞内的DNA修复过程。
此外,它在高保真度DNA合成中的应用,为基因工程和分子生物学研究提供了可靠的工具。
在分子生物学实验中,DNA合成是许多技术的核心,而dNTP/dUTP Mixture (2.5 mM each/5 mM)作为一种特殊的试剂,为DNA合成提供了更多可能性。这种混合液结合了四种脱氧核苷三磷酸(dATP、dCTP、dTTP、dGTP)和脱氧尿苷三磷酸(dUTP),为PCR反应和其他DNA合成实验提供了多功能的支持。 dNTP/dUTP Mixture的独特优势 dNTP/dUTP Mixture (2.5 mM each/5 mM)是一种精心设计的混合液,其中每种dNTP的浓度为2.5 mM,而dUTP的浓度为5 mM。这种独特的配方使其在多种实验中表现出色: PCR反应中的应用:在传统的PCR反应中,dNTPs是DNA合成的基本原料。然而,dUTP的加入为PCR反应提供了额外的功能。例如,某些PCR反应需要引入dUTP来标记DNA,或者在后续实验中利用尿嘧啶糖基化酶(UNG)去除dU,从而实现PCR产物的特异性降解。这种混合液能够满足这些特殊需求,同时保持反应的高效性和特异性。
通过对PAP的功能和调控机制的深入研究,不仅可以帮助我们更好地理解基因表达的分子基础。
磁珠法DNA凝胶回收试剂盒是一种基于磁性纳米技术的核酸纯化工具,能够从琼脂糖凝胶中快速、高效地回收DNA片段,同时去除杂质,确保回收的DNA纯度高、质量好。工作原理该试剂盒利用特制的磁珠表面的功能基团,在特定缓冲液条件下与DNA特异性结合。通过磁场分离,携带DNA的磁珠可以快速从溶液中分离出来,去除杂质后,DNA可以从磁珠上洗脱下来,用于后续实验。产品特点高效回收:适用于从TAE和TBE琼脂糖凝胶中回收100 bp至30 kb的DNA片段,回收率可达70%-80%,尤其对大片段DNA的回收效果优于传统方法。操作简便:无需离心或抽滤,整个回收过程仅需20-30分钟,适合高通量操作。纯度高:有效去除琼脂糖、引物二聚体、dNTP等杂质,回收的DNA可直接用于酶切、连接、测序等下游实验。适用范围广:适用于多种DNA样品类型,包括PCR产物、质粒DNA酶切片段等。应用场景磁珠法DNA凝胶回收试剂盒广泛应用于分子生物学、遗传学、微生物学等领域的核酸纯化,特别适用于需要高纯度DNA的实验,如基因克隆、基因编辑、基因表达分析等。
它能够催化DNA链的5'-磷酸和3'-羟基末端形成磷酸二酯键,从而连接相邻的DNA片段。
分子生物学实验中,RNA凝胶电泳是一种常用的检测手段,用于分析RNA的完整性、纯度和分子量。而5×RNA Loading Buffer则是RNA电泳中不可或缺的重要试剂。 5×RNA Loading Buffer是一种5倍浓缩的上样缓冲液,专为RNA非变性凝胶电泳设计。其主要成分包括甘油、EDTA、溴酚蓝和二甲苯青FF。甘油的作用是增加样品的密度,使RNA样品能够顺利沉入凝胶加样孔中,避免漂浮。EDTA则用于螯合金属离子,防止RNA降解。溴酚蓝和二甲苯青FF作为示踪染料,能够在电泳过程中指示RNA的迁移位置。 使用时,通常将RNA样品与5×RNA Loading Buffer按4:1的体积比混合,例如4μL的RNA样品加入1μL的上样缓冲液,混匀后即可上样。这种缓冲液经过DEPC处理,确保无RNase污染,从而保护RNA样品的完整性。 5×RNA Loading Buffer适用于多种RNA电泳实验,包括非变性琼脂糖凝胶电泳和变性琼脂糖凝胶电泳。它不仅操作简便,还能有效防止RNA降解,确保电泳结果的可靠性。
T7 DNA连接酶是一种来源于T7噬菌体的ATP依赖型双链DNA连接酶,广泛应用于分子克隆和基因工程
热敏感性双链脱氧核糖核酸酶(Thermolabile dsDNase)是一种重组表达的酶,具有特异性剪切双链DNA(dsDNA)的能力,同时对单链DNA(ssDNA)和RNA几乎无活性。这种酶在RNA样品的纯化过程中表现出色,能够快速、安全地去除基因组DNA污染。 产品特性 特异性:仅剪切双链DNA,对单链DNA和RNA无活性。 热敏感性:在55℃加热5分钟即可完全失活,适合在反转录前快速去除RNA样品中的基因组DNA污染。 高效性:2分钟孵育即可完成消化,比牛DNase I的活力约高30倍。 来源:由毕赤酵母(Pichia pastoris)重组表达。 纯度:SDS-PAGE检测纯度≥95%,无其他DNA内切酶与外切酶活性,不含RNA酶活性。 应用场景 RNA纯化:制备不含DNA的RNA样品。 反转录前处理:在反转录前去除RNA样品中的基因组DNA污染。 体外转录后处理:去除T3、T7、SP6等RNA聚合酶催化的RNA合成后的模板DNA。 使用方法 保存条件:-20℃保存,12个月有效。 反应条件:37℃孵育2分钟。 失活条件:55℃加热5分钟。
尽管RNase T1在RNA研究中具有广泛的应用,但其活性和反应条件需要精确控制。
Taq DNA连接酶是一种来源于嗜热菌(Thermus aquaticus)的耐高温DNA连接酶,能够催化与同一互补靶DNA链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5'-磷酸和3'-羟基之间形成磷酸二酯键。这种连接反应仅在两条寡核苷酸链与互补靶DNA完全配对且无间隙的条件下才会发生。 工作原理 Taq DNA连接酶以NAD⁺作为辅因子,在37℃至75℃的高温条件下表现出高效的连接活性。它特别适合用于连接具有较长黏性末端的DNA片段,例如12碱基对的突出末端,但对4碱基末端的连接效率较低。 特点 耐高温:在高温(37℃至75℃)条件下具有高活性,适合高温反应。 高特异性:连接反应仅在寡核苷酸链与靶DNA完全配对时发生,可用于检测单碱基替换。 高保真性:经过改造的高保真Taq DNA连接酶(HiFi Taq DNA Ligase)进一步降低了错配连接率,提高了诊断的准确性。 应用 Taq DNA连接酶广泛应用于以下领域: 分子诊断:用于连接酶检测反应(LDR)和多重连接依赖式探针扩增(MLPA),检测基因组中的单核苷酸多态性(SNP)和拷贝数变异(CNV)。
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