幻灯二

酿酒酵母SHMCCD56428-小肠结肠炎耶尔森氏菌YersiniaenterocoliticaATCC23715-Recombinant Rhesus macaque CD5 Protein,His-Avi Tag

在分子生物学的微观世界中,T7 RNA聚合酶宛如一位技艺高超的“分子工程师”。

在现代免疫学研究中,Flt-3L-His(带有组氨酸标签的Fms样酪氨酸激酶3配体)在小鼠模型中的应用,为科学家们提供了一个强大的工具,用于深入探索免疫系统的奥秘。 Flt-3L-His的独特优势 Flt-3L是一种关键的细胞因子,能够调节多种免疫细胞的发育和功能,特别是在树突状细胞(DCs)的生成和成熟过程中发挥重要作用。通过在Flt-3L蛋白上添加组氨酸标签(His),科学家们可以更方便地纯化和检测这种蛋白,从而在实验中更精确地控制其浓度和作用效果。这种带有组氨酸标签的Flt-3L不仅保留了其生物学活性,还提高了实验的可操作性和重复性。 小鼠模型的重要性 小鼠作为实验动物,其免疫系统与人类高度相似,是研究免疫机制和疾病模型的理想选择。在小鼠模型中,Flt-3L-His的应用可以帮助科学家们更好地理解免疫细胞的发育过程和功能调节。例如,通过在小鼠体内注射Flt-3L-His,可以显著增加树突状细胞的数量和活性,从而增强免疫反应。这种增强的免疫反应可以用于研究疫苗开发、肿瘤免疫治疗以及自身免疫性疾病等多种领域。

SYBR多次冻融实验中表现出良好的稳定性,即使经过20次冻融,其扩增性能与对照组相比无显著差异

微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease,MNase)是一种来源于金黄色葡萄球菌的核酸内切酶,具有广泛的生物技术应用价值。它能够在pH 7-10和Ca²⁺存在的条件下,降解单链、双链、线状和环状等多种形式的DNA和RNA,产生3'磷酸末端的单核苷酸和寡核苷酸。 在染色质免疫沉淀实验(ChIP)中,MNase被广泛用于染色质片段化。它能够特异性地消化核小体间连接区域的裸露DNA,而核小体核心颗粒中的DNA因受组蛋白保护而抵抗酶解,从而完整保留与目标蛋白结合的DNA片段。这种方法比传统的超声波片段化更具特异性,且温和,能显著提升实验分辨率。此外,MNase在核小体定位研究中也发挥重要作用,通过MNase-seq技术,研究人员可以绘制多种生物的核小体图谱,揭示核小体组织的特点及其在基因表达调控中的作用。 MNase还被用于降解蛋白制剂中的核酸,以减少核酸污染。在基因组测序领域,MNase能够快速切割DNA,生成适合测序的片段,提高测序效率。此外,MNase在抗菌领域也有应用,例如通过设计特定的寡核苷酸序列,利用MNase的酶解特性,实现抗生素在感染部位的响应性释放。

小鼠作为实验动物,其免疫系统与人类高度相似,是研究免疫机制和疾病模型的理想选择。

Trizol试剂是一种广泛应用于总RNA提取的试剂,因其高效裂解细胞和保护RNA完整性而备受科研人员青睐。其主要成分包括苯酚、异硫氰酸胍和β-巯基乙醇,这些成分协同作用,能够迅速破坏细胞结构,释放RNA,并有效抑制核酸酶的活性。 工作原理 Trizol试剂通过异硫氰酸胍和苯酚的协同作用,快速裂解细胞并释放核酸和蛋白质。在特定的pH条件下,RNA、DNA和蛋白质会根据其溶解度差异分层:RNA存在于水相中,DNA位于中间层,蛋白质则沉淀在有机层。通过离心分离各层后,可利用异丙醇沉淀RNA,并用75%乙醇洗涤,最终获得高纯度的RNA。 优势 高效性:Trizol试剂能够快速裂解细胞,提取过程通常在1小时内完成。 高纯度:提取的RNA纯度高,A260/280比值通常在1.8-2.0之间,适用于多种下游实验。 适用范围广:适用于多种样本类型,包括细胞、组织、细菌、酵母和病毒等。 操作简便:操作步骤简单,允许同时处理多个样本。

由于UDG在高温下仍保留部分活性,建议在反应结束后添加尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)

磁珠法mRNA纯化试剂盒是一种基于磁珠分离技术的高效工具,广泛应用于从总RNA中快速纯化mRNA。该试剂盒利用磁珠表面的Oligo(dT)序列与mRNA的poly(A)尾特异性结合,通过磁场分离和洗涤步骤,最终获得高纯度的mRNA。 工作原理 磁珠法mRNA纯化试剂盒的核心是磁珠表面修饰的Oligo(dT)序列。这些序列能够特异性结合mRNA的poly(A)尾,通过磁力作用实现快速分离。具体步骤包括: 磁珠结合:将总RNA与Oligo(dT)磁珠混合,使磁珠上的Oligo(dT)与mRNA的poly(A)尾结合。 磁力分离:通过磁力架将磁珠与溶液分离,去除未结合的杂质。 洗涤:用洗涤缓冲液去除残留杂质。 洗脱:用洗脱液将mRNA从磁珠上洗脱下来。 优势 高纯度:纯化后的mRNA纯度高,适合多种下游实验,如RT-qPCR、高通量测序等。 快速高效:整个纯化过程通常在15分钟内完成。 操作简便:所有操作均在同一个离心管中完成,无需复杂设备。 适用范围广:适用于动物、植物、细菌等多种生物样本。 注意事项 磁珠保存:磁珠应避免冷冻或干燥,使用前需恢复至室温并充分混匀。

在分子生物学实验中,RNA凝胶电泳是一种常用的检测手段,用于分析RNA的完整性。

2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专门用于变性核酸电泳的试剂,能够有效解除核酸的二级结构,使其保持单链构型,从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分该缓冲液的主要成分包括:尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。 溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,帮助样品沉入凝胶孔中。使用方法样品处理:将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合70℃加热 3-5 分钟,使核酸充分变性,之后立即置于冰上冷却。上样与电泳:将处理后的样品加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA(ssDNA)和 RNA 的变性凝胶电泳,广泛应用于基因分型检测(如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等)。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。

Fast T4 DNA连接酶的反应条件经过优化,能够在短时间内实现高效连接。

DL2000 DNA Marker是一种广泛应用于琼脂糖凝胶电泳的DNA分子量标准,由特定长度的双链DNA片段组成,可用于估算DNA片段的大小。产品特性DL2000 DNA Marker通常包含6条双链线状DNA条带,分别为100 bp、250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp和2000 bp。其中,750 bp条带的浓度通常较高(约100 ng/5 µL),便于观察和作为参考。该Marker已预混有1×Loading Buffer,可直接用于电泳,使用方便。使用方法 电泳条件:建议在1.0% - 2.0%的琼脂糖凝胶中使用,电泳缓冲液可选用1×TAE或0.5 - 1×TBE。电压一般控制在5 - 10 V/cm,电泳时间根据凝胶浓度和电压调整。 上样量:通常每次取5 µL加入凝胶加样孔中。如果加样孔较宽,可适当增加上样量。 染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,然后在紫外灯下观察电泳条带。保存条件短期保存:4℃可保存6个月。长期保存:-20℃可保存1 - 2年。避免反复冻融:反复冻融可能导致条带降解,影响电泳效果。

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