pMAL-p4x-Recombinant Human A2AR Protein-VLP-白地霉SHMCCD55293
RNase III的活性受到多种因素的调控,包括细胞内的离子浓度、其他蛋白质因子以及RNA的结构特征
Trizol试剂是一种广泛应用于总RNA提取的试剂,因其高效裂解细胞和保护RNA完整性而备受科研人员青睐。其主要成分包括苯酚、异硫氰酸胍和β-巯基乙醇,这些成分协同作用,能够迅速破坏细胞结构,释放RNA,并有效抑制核酸酶的活性。 工作原理 Trizol试剂通过异硫氰酸胍和苯酚的协同作用,快速裂解细胞并释放核酸和蛋白质。在特定的pH条件下,RNA、DNA和蛋白质会根据其溶解度差异分层:RNA存在于水相中,DNA位于中间层,蛋白质则沉淀在有机层。通过离心分离各层后,可利用异丙醇沉淀RNA,并用75%乙醇洗涤,最终获得高纯度的RNA。 优势 高效性:Trizol试剂能够快速裂解细胞,提取过程通常在1小时内完成。 高纯度:提取的RNA纯度高,A260/280比值通常在1.8-2.0之间,适用于多种下游实验。 适用范围广:适用于多种样本类型,包括细胞、组织、细菌、酵母和病毒等。 操作简便:操作步骤简单,允许同时处理多个样本。
Poly(U)聚合酶可能参与了细胞内的某些RNA代谢过程,但其具体机制和生理功能仍需深入研究。
2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专为变性核酸电泳设计的试剂,能够有效解除核酸的二级结构,使其保持单链状态,从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分该缓冲液的主要成分包括:尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持其单链构型。 溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,帮助样品沉入凝胶孔中。使用方法 样品处理:将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合,70℃加热 3-5 分钟,使核酸充分变性。上样与电泳:处理后的样品可直接加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA(ssDNA)和 RNA 的变性凝胶电泳,广泛应用于基因分型检测(如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等)。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。储存条件该缓冲液应冷冻保存(-20℃),以保证其稳定性和有效性。
这种特性使得EB在低浓度下(如10 µg/ml)染色后无需脱色处理,即可在紫外光下清晰观察到核酸条带
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,探针法因其高特异性和高灵敏度而备受青睐,尤其适用于需要精确检测目标基因的实验场景。然而,某些qPCR仪器(如部分ABI系列)需要高浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异,以确保定量的准确性和重复性。为此,Probe qPCR Mix (2×, High ROX)应运而生,它为这些特定需求提供了完美的解决方案。 高浓度ROX的重要性 ROX参考染料在qPCR实验中扮演着关键角色,它能够校正由于仪器荧光检测系统的波动、反应体系的差异以及孔间位置的差异所导致的非特异性荧光信号。对于某些qPCR仪器,高浓度的ROX是实现精准定量的必要条件。Probe qPCR Mix (2×, High ROX)中的ROX浓度经过精确调整,能够满足这些仪器对高浓度ROX的需求,从而有效提高定量的准确性和重复性。 产品特点 优化的反应体系:Probe qPCR Mix (2×, High ROX)含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、热启动Taq DNA聚合酶以及其他必要的成分。
后染时,将电泳后的凝胶浸泡在稀释后的染色液中,室温振荡染色10-30分钟。
Tris-硼酸电泳缓冲液(10×TBE)是一种高浓度的缓冲液,广泛应用于核酸电泳实验中,特别适用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳。它由Tris、硼酸和EDTA组成,具有强大的缓冲能力,能够维持稳定的pH值,从而提高电泳的分辨率。产品特性成分:主要由900 mM Tris-硼酸和20 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释10倍后得到的1×TBE工作液含有90 mM Tris-硼酸和2 mM EDTApH值约为8.0。缓冲能力强:适合较长时间电泳,能够维持稳定的pH值,不易出现pH波动。高分辨率:特别适用于分离小于1 kb的DNA片段,能够提供清晰的条带。保存条件:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将10×TBE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释10倍,制备1×工作液。电泳操作:将稀释后的1×TBE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。
这些变体不仅具有更高的耐热性,还能够适应不同的反应条件,满足各种实验需求。
Gel-Red是一种高灵敏度、低毒性的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB)。它具有与EB相同的光谱特性,能够在不改变现有成像系统的情况下直接替换EB。产品特性安全性高:Gel-Red是一种油性大分子(分子量>1000),难以穿透细胞膜,显著降低了细胞毒性和致突变性。灵敏度高:检测灵敏度比EB高8-10倍,尤其对小分子量DNA的检测更为灵敏。稳定性好:室温下稳定,可耐受微波加热,光稳定性强,操作无需避光。适用范围广:适用于琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳,可用于dsDNA、ssDNA和RNA的染色。使用方法胶染法(前染法):制备琼脂糖凝胶时,按1:10000的比例加入Gel-Red(例如,50 mL凝胶溶液中加入5 µL 10000×Gel-Red),混匀后倒胶。按常规方法进行电泳。泡染法(后染法):电泳后,将凝胶放入染色液中(用0.1 M NaCl溶液将Gel-Red稀释3300倍),室温振荡染色30分钟。染色液可重复使用3次,4°C或室温避光保存1周。注意事项Gel-Red对玻璃和非聚丙烯材料有亲和力,建议使用聚丙烯容器。
胶染法(前染):在制备琼脂糖凝胶时,按 1:10000 的比例加入 4S GelRed 染料
在分子生物学领域,T4 RNA连接酶(T4 RNA Ligase)是一种不可或缺的工具酶,它以其独特的功能和高效的连接能力,为RNA研究提供了强大的支持。T4 RNA连接酶主要来源于T4噬菌体,能够催化RNA分子之间的磷酸二酯键形成,从而实现RNA片段的连接。 T4 RNA连接酶的功能 T4 RNA连接酶的主要功能是连接RNA分子。它可以将两个RNA片段的5'磷酸基团和3'羟基末端连接起来,形成稳定的磷酸二酯键。这种连接反应不仅适用于单链RNA,还可以用于双链RNA的连接。此外,T4 RNA连接酶还可以用于修复RNA分子中的断裂位点,恢复其完整性。 广泛的应用 T4 RNA连接酶在RNA研究中具有广泛的应用。例如,在RNA克隆实验中,它被用于连接RNA片段与载体,从而构建重组RNA分子。在RNA结构分析中,T4 RNA连接酶可以用于连接RNA探针,帮助科学家研究RNA的二级结构和三级结构。此外,它还可以用于合成环状RNA,这种环状RNA在基因调控和疾病研究中具有重要的应用前景。 优化的反应条件 T4 RNA连接酶的反应条件相对温和,通常在中性pH值和较低温度下进行。
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